评估生物技术相关酶的最适温度和pH的新方法:基于实验数据绘制等值线图

上海工业生物技术研发中心 2017/11/1 10:56:31
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糖苷水解酶对于各种工业和科学应用是重要的。测定其温度以及pH最佳值和范围对于评估酶是否适用于生物技术过程至关重要。酶的这些基本特征通常通过两个单独的测量来确定。然而,这些导致在一个温度下的pH范围的二维评估(反之亦然),且无法预测任何pH /温度组合下的相对酶性能。

 近期发表于《Biotechnology for Biofuels》上的一项研究《A new method to evaluate temperature vs. pH activity profiles for biotechnological relevant enzymes》描述了一种基于实验数据的新方法:研究人员平行测定了96种不同pH和温度组合下酶的相对活性,他们在微量滴定板中使用梯度PCR循环仪和基于柠檬酸盐 - 磷酸盐的缓冲系统,该方法可实现pH值和温度最佳值的同时测定,经试验验证该方法既适用于酶也适用于多种酶混合物。实验程序很快速,所获得的数据再通过几步简单的步骤可被转化为一个三维等值线图,可以一目了然地观察了、到pH、温度和酶活性之间的关系。研究人员使用糖苷水解酶成功测试了该方法,理论上也是适用于其他酶的。

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1.等值线图